Барбарис обыкновенный – колючий кустарник высотой до 2,5 м с хорошо развитой корневой системой.На стеблях находятся множество трех- пятираздельных колючек,  стволы покрыты сероватой корой. Листья эллиптические, длиной до 4 см, с мелкопильчатым краем пластинки, короткими черешками, плотные. Цветки небольшие, ярко-желтые, в соцветиях длиной до 6 см. , с двойным шестичленным околоцветниом,  чашелистики отличаются от лепестков по внешнему виду. Плоды – продолговатые, ярко-красные ягоды длиной до 12 мм. Цветет в мае-июне. Плоды созревают в августе-сентябре и остаются на кустах до зимы. Берберин  содержится в корнях барбариса обыкновенного. По литературным данным  в Berberis vulgaris, с  содержанием  до 0,5- 1,5%, а так же  во многих растениях семейств лютиковых (Ranunculaceae), барбарисовых (Berberidaceae), луносемянниковых (Menispermaceae), рутовых (Rutaceae) и др . Биологическое действие: Снижает артериальное давление, ослабляет сердечную деятельность, вызывает сокращение гладкой мускулатуры матки и кишечника, усиливает отделение желчи.[ 1-3 ].

В Грузии барбарис обыкновенный встречается в лесах средней части гор, по лесным опушкам, по берегам рек. Барбарис распространён почти во всех районах Грузии, кроме Джавахетии и Месхетии.

При подборе системы для хроматографирования наиболее эффективным оказалось разделение в тонком закрепленном слое силикагеля в системе н-бутанол-ледяная уксусная кислота-во­да (10:1:3). При этом на хроматограмме наблюдается 4 резко очерченных пятна, одно из которых (Rf=0,43) находится на уровне стандартного образца берберина. Идентичность на­ходящегося в этом пятне вещества с берберином была доказа­на методами многократного хроматографирования, добавок берберина на стартовую полосу, и ИК – спектрофотометрированием элюата. Для элюации из пятна берберина были использованы, как органические растворители, так и растворы минеральных кислот. При этом оказалось, что наиболее перспективно при­менение 10%раствора уксусной кислоты, что позволяет поднять коэффициент элюации до 96%. Благодаря тому, что получаемые при этом элюаты окрашены в слабожелтый цвет, возникает во­зможность их непосредственного фотометрирования, При опреде­лении индукционного периода выяснилось, что получаемые элюаты сохраняют стабильную окраску в течение 48 часов.

Хроматографирование проводилось в тонком слое на сте­клянных пластинках размером 9 х 13см. В качестве носителя использовался силикагель марки ЛСЛ₂₅₄ или КСК с добавкой гипса и воды (соотношение силикагель-гипс-вода = 4,5:0,5:12). Пластинки сушатся на воздухе, а затем активируются при 100-110⁰ в течение 30 минут.

Построение градуировочного графика.

А. Для приготовления стандартного раствора О,5г (т.н.) 2-ды перекристализированного из спирта фармакопейного берберина бисульфата растворяется в метаноле в 100мл мерной колбе.

Микропипеткой определенные объемы данного раствора на­носятся на пластинку с целью получения концентраций при элюации в пределах 0,01-0,5мг%.

Б. После хроматографирования и высушивания пластинки на воздухе участки сорбента желтого цвета, содержащие берберин, соскабливаются с пластинки в 50мл стаканчики и алка­лоид элюируется по порциями по 8-10мл 8 раз (до получения бесцветного извлечения) 10%-ой уксусной кислотой. Полученные уксусно-кислотные извлечения фильтруются через двойной бумажный фильтр в 100мл мерные колбы, после чего объем раствора доводится 10%-ой уксусной кислотой до метки. Раство­ры спектофотометрируются при длине волны l=345нм  по отношению к раствору 10%-ой уксусной кислоте.

Закон Бугера-Лаьерта-Бера выполняется в пределах 0,01-0, 3мг%.

Определение содержания берберина в сырье.

а) 10г тонкоизмельченных корней барбариса обыкновенного (т.н.) просеянных через сито с диаметром отверстий 1мм, вносятся с колбу с обратным холодильником, куда предварительно зали­вается 200мл 95°спирта,содержащего 5% уксусной кислоты. Смесь выдерживается при температуре кипения в течение 2-3 часов.Полнота извлечения контролируется качественными реакциями  и хроматографией в тонком слое последующих сгущеных извлечений. Полученный спиртовый раствор суммы алкалоидов фильтруется через бумажный фильтр и сгущается под вакуумом. Из сгу­щенного спиртового экстракта  отбирается 0,05-0,2 мл раствора ( взависимости от концентрации) и наносится на пластинку , на паралелную полосу наносится I капля 1% стандартногораствора берберина бисульфата. После храматографирования и высушивания пластинки на воздухе, от­мечается пятно, расположенное на уровне стандартного обра­зца берберина. После чего ход анализа идентичен описанному при построении градировочного графика берберина (часть Б). Содержание берберина в сырье в процентах (X₁)- опреде­ляется по формуле:

                                            (1)

А – навеска сырья) мг;

V₁ - объем полученного сгущенного спиртового раствора, нанесен­ного на пластинку, мл;

V₂  -объем полученного сгущенного спиртового экстракта, мл;