Разработка методики количественного определения некоторых биологически активных веществ в мягких лекарственных формах, содержащих лечебную грязь «Ахтала»

Явич Павел Абрамович — Sun, 25 Aug 2013 10:04:12 +0000

Лечебная грязь «Ахтала» в течение многих лет применяется как в бальнеологии (грязевые ванны и апликации), так и при лечении ряда заболеваний [1]. Однако она используется только в нативном виде, в процессе курортного лечения, т.к. отсутствуют стандартизованные лекарственные формы. Следует учитывать и тот факт, что ее расход на одну процедуру составляет не менее 200 кг, а возможность регенерации весьма ограниченна, даже в этом случае потери грязи составляют в среднем до 20% от использованного количества. В связи с этим в прошлые годы проведена определенная работа по созданию лекарственных форм, содержащих грязь «Ахтала» [2-4]. Для усиления действия в эти потенциальные лечебные препараты вводятся различные лекарственные вещества, широко применяемые, например, в гинекологии .

В настоящем сообщении приводятся данные по стандартизации подобного типа мази, содержащей, наряду с грязью «Ахтала», фуксин. Учитывая, что грязь «Ахтала» обладает определенными сорбционными свойствами, необходимо было на начальной стадии исследования подобрать растворитель, обеспечивающий максимальную степень извлечения фуксина из мази. Исследовалась целесобразность применения в качестве экстрагентов лиофильных спиртов С₁-С₄ в чистом виде и с добавкой органических кислот, а также ряд лиофобных растворителей. Наиболее целесообразным оказалось использование метанола, содержащего 10% конц. уксусной кислоты. При этом колличество необротимо сорбированного фуксина находилось в пределах 0,0078 г/г абсолютно сухой массы лечебной грязи. Извлечения, в этих условиях, в определенном разведение, непосредственно из самой грязи «Ахтала» имеют поглощение в УФ-свете в области 240-350 нм., максимум же поглощения раствора фуксина в этом же растворителе в той же степени разведения находится в области 550-560 нм., что дает возможность проведения спектрофотометрического анализа.

Методика определения. 0,5 г. мази (т.н.) помещается в колбу с обратным холодильником, туда же заливается 50 мл. метилового спирта, содержащего 10% конц. уксусной кислоты. Экстракция проводится при температуре 50 ± 2⁰в течении одного часа. Извлечение переносится в 100 мл. мерную колбу и доводится до метки тем же растворителем, который был уже использован для промывания экстракционной колбы. Охлажденное до комнатной температуры извлечение отстаивается в течении двух часов либо центрифугируется с использованием стеклянной пробирки. 0,1 мл. извлечения (т.о.) переносится в 25 мл. мерную колбу и доводится до метки тем же растворителем. Оптическая плотность раствора определяется при длине волны 550-560 нм. Расчет содержания фуксина в растворе проводится по сравнению с величиной оптической плотности соответствующего стандартного раствора.

Данные по валидации предлагаемой методике анализа приводятся в таблицах 1-5. В таблице 1 показанны результаты анализов, являющихся доказательством существования необратимой сорбции определенного колличества фуксина. Линейность определения находится в пределах 0,08-1,2 мг%.

Таблица1

Правильность определения

Определение содержания фуксина, исходя из количества внесенного в мазь
взято пробы, г.	содержание фуксина в пробе, г.	добавленно пробы, г.	содержание в ней фуксина, г.	итого фуксина, г.	полученно фуксина, г.	ошибка определения, %
0,505	0,00505	0,2001	0,00203	0,00708	0,006	15,2
0,5012	0,00501	0,4050	0,00405	0,00906	0,0085	11,5
0,5011	0,0050	0,5052	0,00505	0,1005	0,009	10,5
Исходя из колличества фуксина по данным его аналитического определения в мази
взято пробы, г.	содержание фуксина в пробе, г.	добавленно пробы, г.	содержание в ней фуксина, г.	итого фуксина, г.	полученно фуксина, г.	ошибка определения, %
0,5213	0,00463	0,2111	0,0023	0,0069	0,0065	5,8
0,5052	0,00449	0,4132	0,0036	0,0081	0,0076	6,18
0,5232	0,00465	0,5036	0,0045	0,00915	0,086	6,02

Таблица 2

Определение сходимости результатов анализа

№ пробы					среднее %	относительное отклонение max, %	относительное отклонение min, %
1	2	3	4	5	среднее %	относительное отклонение max, %	относительное отклонение min, %
Определено содержание, %
0,88	0,87	0,89	0,9	0,89	0,886	1,01	1,81

Таблица 3

Воспроизводимость (метрологическая характеристика)

ƒ		s²	s	p	t_p,f	Δx	ε_x=3
4	0.884	0.0008	0.028	95	2.57	0.032	3.6

Таблица 4

Специфичность (добавка метиленового синего 0,2%)

1	2	3	4	средний результат, %	относительное отклонение
					max, %	min, %
Определено содержание, %
0.86	0.89	0.88	0.87	0.875	1.02	1.72

Таблица 5

Промежуточная претензиозность

понедельник	вторник	среда	четверг	пятница	№ пробы
№ аналитика					1	2	3
1	2	1	2	1
					Определено содержание, %
					0.89	0.87	0.88
					0.88	0.9	0.88
					0.9	0.87	0.87
					0.88	0.88	0.9
					0.9	0,87	087
					среднее, %
					0.89	0.878	0.88
					max относительное отклонение, %
					1.01	2,45	2.23

Электронный научно-практический журнал «Современные научные исследования и инновации» » Фуксин

Разработка методики количественного определения некоторых биологически активных веществ в мягких лекарственных формах, содержащих лечебную грязь «Ахтала»