В 2014 году специализированными учреждениями Минздрава России зарегистрировано 2719 тыс. лиц с наркологическими  расстройствами или 1888,8 больных на 100 тыс. населения или почти 2% общей численности населения. По сравнению с 2013 годом в 2014 году показатель общей заболеваемости наркологическими расстройствами снизился на 4,1%. По сравнению с 2005 годом, когда наркологическими учреждениями страны было зарегистрировано максимальное число пациентов с наркологическими расстройствами  (2 426,8 на 100 тыс. населения), данный показатель снизился на 22,2%. Среди отдельных субъектов Российской Федерации максимальная заболеваемость (4117,5 на 100 тыс. населения) зарегистрирована в Сахалинской области, минимальная (311,3 на 100 тыс. населения) – в Республике Ингушетия.

В средствах массовой информации обостряется внимание к проблеме роста наркозависимости, увеличения случаев приема наркотиков, однако данные официальной статистики свидетельствует, что в стране другая тенденция – происходит постепенное сокращение числа официально зарегистрированных наркозависимых. Однако, на наш взгляд, основная причина таких изменений состоит в снижении эффективности статистического учета и мероприятий по выявлению наркозависимых.

В целом же, по официальным данным, за изучаемый период этот показатель сократился на 18,9%. При этом следует обратить внимание, что наибольший спад числа наркозависимых произошёл в 2009 году по отношению к 2008 году, в 2011 году по отношению к 2010 году и в 2014 году по отношению к 2013 году (таблица 1).

Таблица 1 – Ряды динамики распространения официально зарегистрированной наркомании в РФ в 2005-2014 гг.

Для исследования динамики числа официально зарегистрированных наркозависимых в РФ в 2005-2014 гг. нами использован корреляционно-регрессионный анализ, методология проведения которого соответствует теоретическим положениям эконометрики [1, С. 11-18; 2, С. 17-29]. Полученные в его ходе эконометрические модели различного вида, имеющие специфические математические свойства позволяют выявлять закономерностей в изменении результативных признаков [3].

Отрицательный показатель «b» в степенной функции говорит о том, что функция убывает, а также величина коэффициента «b» в степенной функции показывает, что на 8,7% процентов изменится в среднем результат, при изменении фактора на 1%. Линейная модель позволяет оценить усредненную величину сокращения зарегистрированных наркозависимых, составляющая 13809 человек. Показатель параболы «а» является отрицательным (-476,11), ветви параболы направлены вниз, что говорит о тенденции ускоренного сокращения. Свободные параметры линейной, параболической и логарифмической моделей свидетельствуют о базовом уровне на уровне 666-680 тыс. человек. Модели, на основе которых проведен анализ, представлены в табл.2.

Таблица 2 – Модели аппроксимации динамики числа официально зарегистрированных наркозависимых в РФ в 2005-2014 гг.

Несмотря на стабильную динамику снижения наркозависимости, полученные данные являются скорее отрицательным прогнозом, так как снижение  официально зарегистрированной  динамики наркомании говорит о низкой эффективности регистрации наркозависимых лиц. Усугубляется проблема исследования наркозависимости.

Отношение больных к лечению и, следовательно, проблема регистрации в настоящее время изменились. Если раньше больные наркоманией были вынуждены посещать наркологические учреждения и получать соответствующее лечение, опасаясь судебного преследования, то в настоящее время, в связи с отсутствием в стране «института принудительного лечения», данные больные от лечения уклоняются и обращаются за медицинской помощью крайне редко, в большинстве своем — по настоянию родных и близких. Все это сказывается на здоровье больных, поскольку наряду с основным диагнозом — наркомания — многие являются ВИЧ-инфицированными, больными хроническими гепатитами.

Социальный эффект наркомании выражается в ее прямом влиянии на смертность населения, на все большее вовлечение молодежи, рост детской наркомании. Наркомания оказывает опосредованное влияние на рост  социального сиротства, на рост неполных семей. Но помимо ярко выраженного негативного социального влияния наркомания наносит и существенный  удар по экономике.

Следует отметить, что на распространение наркозависимости среди населения страны влияет не один фактор, а совокупность как качественных, так и количественных факторов, таких как пропаганда здорового образа жизни в регионах, уровень дохода в регионах, частота употребления алкогольных напитков.

В свою очередь, применение различного вида регрессионных моделей для исследования динамики официально зарегистрированных алкоголезависимых также позволило выявить ряд закономерностей. Так, Отрицательный показатель «b» в степенной функции говорит о том, что функция убывает, а также величина коэффициента «b» в степенной функции показывает, что на 9,7% процентов изменится в среднем результат, при изменении фактора на 1%. Коэффициент детерминации (равный 0,706) свидетельствует, что данной моделью объясняется 70,6% вариации результативного признака. Показатель параболы «а», также как и в случае с предыдущим результативным показателем, является отрицательным (-2,8859), что свидетельствует о тенденции ускоренного сокращения официально зарегистрированных алкоголезависимых. Свободные параметры линейной, параболической и логарифмической моделей свидетельствуют о базовом уровне на уровне 1556-1638 тыс. человек. Модели, на основе которых проведен анализ, представлены в таблице 3.

 Таблица 3 – Модели аппроксимации динамики числа официально зарегистрированных алкоголезависимых в РФ в 2005-2014 гг.

За 2003 – 2014 годы заболеваемость алкоголизмом, как и численность наркозависимых снизилась, однако, нельзя говорить о прямой взаимосвязи данных факторов, не учитывая влияние других деструктивных тенденций. Необходимо научиться выявлять реальное количество наркозависимых лиц, исследовать причины данной зависимости, обозначить факторы, влияющие на данный показатель.

Мы рассмотрели динамику распространения официально зарегистрированной наркомании. Нельзя не отметить, что на экономику влияет ряд опосредованных факторов.  В наркоманию вовлекается  трудоспособная часть населения с самой высокой производительностью, при этом  на современном этапе возрастает нагрузка пожилыми, численность трудоспособного населения сокращается, что обусловлено низкой рождаемостью в 90-е годы. Экономика испытывает дефицит  трудоспособного населения при росте социальных обязательств перед пенсионерами. В данном аспекте повышается негативное влияние наркомании, вызванное потерей трудоспособного населения.

В обмене входящих в состав эфиров холестерина и триглицеридов высших жирных кислот принимает участие карнитин, способный синтезироваться в клетках из метионина и лизина, а также поступающий в организм в составе продуктов питания. Оценка плазменной концентрации карнитина у пациентов с хронической алкогольной интоксикацией показала длительное, сохраняющееся в течение двух месяцев после заключительного приема алкоголя снижение уровней общего, свободного и ацилкарнитина [3, с. 548]. Изменение уровня карнитина в плазме сопровождались аналогичным снижением экскреции данного метаболита у больных алкоголизмом [4, с. 160]. Очевидно, что функциональная активность и эффективность действия карнитина в данных условиях будет снижена и может предопределить изменения других показателей обмена липидов.

Цель исследования: оценить воздействие L-карнитина на уровень показателей липидного обмена в крови при моделировании синдрома отмены этанола.

Задачи исследования:

1. Выяснить содержание триглицеридов в сыворотке крови при формировании синдрома отмены этанола в условиях применения L-карнитина;
2. Оценить воздействие L-карнитина на уровень общего холестерина в сыворотке крови при экспериментальном синдроме отмены этанола;
3. Определить содержание холестерина в липопротеинах высокой плотности в сыворотке крови при использовании L-карнитина условиях моделирования физической зависимости от алкоголя.

Материалы и методы исследования

В эксперименте использовали 30 беспородных крыс-самцов массой 180-200 г. Для формирования физической зависимости от этанола использовали модель экспериментального алкоголизма, разработанную проф. Абдрашитовым А.Х. и соавт. [5, c. 85-89]. Согласно этой модели, животным интрагастрально вводили 25% раствор этанола в дозе 8 г/кг в сутки в течение 4 суток и 4 г/кг/сут на 5 сутки (группа «Этанол»). Для оценки влияния L-карнитина (препарат «L-КАР») на показатели липидного обмена в период реакции отмены этанола была сформирована группа животных, которым интрагастрально вводили «L-КАР» в дозе 300мг/сут в период моделирования реакции отмены (группа «Этанол+L-КАР»). Выведение животных из эксперимента осуществлялось путем декапитация под эфирным наркозом через 1 сутки после последнего введения алкоголя. Группу сравнения составили животные, которым по аналогичной схеме вводили эквиобъемное количество воды. Определение содержания триглицеридов, концентрации общего холестерина и холестерина в липопротеинах высокой плотности в сыворотке крови проводилось с использованием наборов реагентов компании «Вектор-Бест». Статистическая обработка полученных данных проводилась с помощью компьютерных программ AnalystSoft Inc., Statplus, версия 5 и Microsoft Excel. В качестве основных характеристик описательной статистики применяли медиану (Ме), нижний 25-й (L) и верхний 75-й (Н) квантили (Me; L; H). Оценку статистической значимости различий проводили с использованием непараметрических критериев: Манна-Уитни (U) и Вилкоксона для связанных выборок (W).

Результаты исследования и их обсуждение

Синтетический аналог естественного L-карнитина применяется в лечебной практике с целью воспроизведения и усиления его физиологической функции – обеспечение транспорта в матрикс митохондрий клеток организма человека для последующего метаболического процесса β-окисления насыщенной пальмитиновой кислоты. В условиях моделирования действия этилового алкоголя на клеточные компоненты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии было установлено его влияние в отношении фосфолипидов цитоплазматических мембран. L-карнитин уменьшал уровень фосфолипидов, соответственно влияя на жидкостность мембран гепатоцитов [6, c. 44].

Несмотря на литературные данные о недостаточной концентрации карнитина в плазме крови, уменьшении параметров его выделения при хронической алкогольной интоксикации и возможного, вследствие этого, изменения важнейших показателей, характеризующих обмен липидов, измерение содержания общего холестерина, холестерина липопротеинов высокой плотности, триглицеридов в сыворотке крови животных, подвергшихся принудительной алкоголизации (группа «Этанол»), позволило выявить лишь тенденцию к увеличению всех вышеперечисленных показателей.

Данные настоящего исследования соотносятся с тем, что экспериментальное, длительностью один месяц моделирование хронического влияния этанола также не выявило изменений в уровнях общих липидов и триглицеридов в плазме лабораторных животных [7, c. 56]. Отсутствие изменений концентраций общего холестерина и триглицеридов в сыворотке крови при экспериментальном воспроизведении физической зависимости от алкоголя может быть связано с тем, что этиловый спирт: а) сначала заменяет высшие предельные жирные кислоты в качестве основного внутриклеточного энергетического субстрата; б) затем ускоряет этерификацию высших жирных кислот с образованием эфиров холестерина и триглицеридов в клетках; и в) аккумулирует их в гепатоцитах.

В группе «Этанол+L-КАР» было установлено статистически значимое повышение содержания холестерина липопротеинов высокой плотности на 6,8% (pU=0,049) по сравнению группой контрольных животных и составило 0,63 (0,62;0,63) ммоль/л. Также нами были выявлены изменения в уровне триглицеридов в сыворотке крови данной группы животных по сравнению с группой «Этанол». Содержание триглицеридов было снижено на 16,7% (pW=0,022) и составило 0,5 (0,4; 0,5) ммоль/л.

Причины повышения уровня холестерина липопротеинов высокой плотности при развитии реакции отмены этанола на фоне использования L-карнитина могут быть связаны: во-первых, с тем, что из-за увеличенного транспорта карнитином насыщенной пальмитиновой кислоты в матрикс митохондрий для окисления в формировании эфиров холестерина и триглицеридов будут участвовать в большем количестве ненасыщенные и полиненасыщенные высшие жирные кислоты, которые в данных условиях в значительной степени необходимы для оптимальных параметров паракринной регуляции клеточного метаболизма эйкозаноидами и которые транспортируются липопротеинами высокой плотности; во-вторых, с тем, что в условиях избыточного образования ацетил-КоА при алкоголизме происходит трансформация его использования в клетке с усилением пути образования холестерина, избыток которого из клеток также ответственны удалять липопротеины высокой плотности.

Снижение содержания триглицеридов, вероятно, обусловлено тем, что предполагаемая под действием L-карнитина интенсифицированная доставка пальмитата в митохондрии сопряжена с усилением в условиях хронической алкогольной интоксикации периферического липолиза триглицеридов и высвобождением в кровь свободных, неэтерифицированных жирных кислот.

Таким образом, можно сделать заключение об определенном модулирующем эффекте L-карнитина в условиях экспериментального алкоголизма на показатели сыворотки крови, характеризующие состояние обмена липидов.

Поскольку существует явная возможность попробовать применить положения теории биологических функций и биологических реакций к рассмотрению алкоголь-ассоциированных метаболических нарушений при столь же явной и нерешенной проблеме алкоголизма, то существующее положение вещей предрасполагает к оценке биохимических показателей при алкогольной аддикции с несколько иных позиций.

Цель исследования: оценить влияние предшественника восстановленного глутатиона на содержание мочевой кислоты в крови при алкогольном абстинентном синдроме.

Задачи исследования:

1. Выяснить динамику уровня мочевой кислоты в сыворотке крови при формировании алкогольной абстиненции;
2. Оценить воздействие предшественника восстановленного глутатиона на содержание мочевой кислоты в сыворотке крови у больных алкоголизмом.

Материалы и методы исследования

Проведено исследование уровня мочевой кислоты в сыворотке крови пациентов наркологического диспансера с диагнозом: «Психические и поведенческие расстройства в результате употребления алкоголя, средняя стадия. Синдром активной зависимости. Состояние отмены, неосложненное, средней степени тяжести» (F.10.242, F.10.302), выборка которых была сформирована в соответствии с критериями включения и исключения.

Критерии включения: возраст 35-50 лет; состояние алкогольной абстиненции при поступлении в стационар; информированное согласие пациента (или его родственников) на проведение исследования.

Критерии исключения: наличие аллергических, эндокринных или других заболеваний, способных оказать влияние на течение основного заболевания и результат исследования; прием наркотических и психотропных средств до поступления в стационар; отказ от участия в исследовании (по результатам беседы с пациентом или его родственниками).

С использованием этих критериев были сформированы группы больных, у которых взятие крови для исследования проводился в 1 (группа А1, n=12), 3 (группа А3, n=12), 7 (группа А7, n=12) и 10 (группа А10, n=12) сутки после поступления в стационар. Купирование абстинентных расстройств проводилось обычными медикаментозными средствами (дезинтоксикация, седативная терапия, витаминотерапия).

Для оценки влияния предшественника восстановленного глутатиона (препарат «Глутоксим») на динамику содержания мочевой кислоты были сформированы группы больных, у которых в лечении, дополнительно к стандартной схеме, использовали «Глутоксим», который вводили в течение 10 суток с момента поступления пациентов в стационар, внутривенно, в дозе 15 мг в сутки. Взятие крови у данных пациентов проводилось в 1 (группа А1+Г, n=10), 3 (группа А3+Г, n=10), 7 (группа А7+Г, n=10) и 10 (группа А10+Г, n=10) сутки лечения. Группу сравнения (группа К) составили 10 условно здоровых лиц аналогичной возрастной категории.

Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови проводилось с использованием набора реагентов компании «Вектор-Бест». Принцип метода основан на том, что мочевая кислота под влиянием уриказы окисляется кислородом воздуха с образованием углекислого газа, аллантоина и пероксида водорода. Последний при взаимодействии с дихлоргидроксибензолсульфонатом в присутствии аминоантипирина образует хинонимин – окрашенный продукт. Интенсивность окраски реакционной смеси прямо пропорциональна концентрации мочевой кислоты в пробе. Содержание мочевой кислоты рассчитывали с учетом концентрации мочевой кислоты в калибраторе, равной 500, и выражали в мкмоль/л.

Статистическая обработка полученных данных проводилась с помощью компьютерных программ AnalystSoft Inc., Statplus, версия 5 и Microsoft Excel. В качестве основных характеристик описательной статистики применяли медиану (Ме), нижний 25-й (L) и верхний 75-й (Н) квантили (Me; L; H). Оценку статистической значимости различий проводили с использованием непараметрических критериев: Манна-Уитни (U) и Вилкоксона для связанных выборок (W) [7].

Результаты исследования и их обсуждение

Уровень мочевой кислоты в сыворотке крови у больных алкоголизмом при развитии алкогольной абстиненции составил: в группе «А1» 331,6 (282,5; 349,2) мкмоль/л, что на 31,3 % (pU=0,0033) выше, чем в группе сравнения.; в группе «А3» 308,6 (296,5; 332,1) мкмоль/л, что также на 20,9 % (pU=0,0033) выше, чем в группе сравнения; в группе «А7» 274,8 (257,2; 249,9) мкмоль/л; в группе «А10» 276,9 (253,1; 299,6) мкмоль/л. Статистически значимых отличий от группы контроля в группах «А7» и «А10» не выявлено (pU=0,1294 и pU=0,1379, соответственно).

При введении предшественника восстановленного глутатиона в схему лечения пациентов в группе «А1+Г» сохраняется повышенным уровень мочевой кислоты на 17,4 % (pU=0,0252) по сравнению с контролем и составляет 299,6 (267,0; 321,8) мкмоль/л. В группах «А3+Г», «А7+Г», «А10+Г» содержание мочевой кислоты составило 270,7 (260,8; 291,3) мкмоль/л; 276,9 (256,2; 319,2) мкмоль/л; 282,2 (261,4; 304,8) мкмоль/л, соответственно. Достоверных статистических отличий в этих группах от группы сравнения не выявлено (pU=0,1041; pU=0,0588; pU=0,0640, соответственно).

Статистически значимых отличий в группах пациентов с использованием в схеме лечения предшественника восстановленного глутатиона от групп больных, получавших стандартную терапию, при применении критерия Вилкоксона выявлено не было (pW=0,3081; pW=0,0858; pW=0,4755; pW=0,8127, соответственно).

Соединения эндогенного характера можно отнести к группе антиоксидантов в том случае если: 1) для вещества характерно наличие высокой концентрации в тканях и/или биологических жидкостях; 2) молекулы предполагаемого антиоксиданта способны связываться с соединениями, обладающими прооксидантными свойствами; 3) в результате реакции формируются менее химически агрессивные структуры [8, с. 615-631] .

После утраты в филогенезе клетками организма человека возможности образовывать аллантоин из-за прекращения синтеза фермента уриказы (уратоксидазы) [9, с. 78] и потери способности формировать аскорбиновую кислоту [10,с. 53] концентрация мочевой кислоты в крови стала значительно более высокой по сравнению с другими видами животных.

Реализация антиоксидантного действия мочевой кислоты обеспечивается ее присутствием в плазме крови на 98% в виде натриевой соли в состоянии диссоциации. В результате чего отмечается нахождение мочевой кислоты в кров, моче в виде одновалентного урат-аниона, который обладает повышенной стабильностью и не дает каскада цепных реакций образования перекисных радикалов [5, с. 284].

Умеренное потребление слабоалкогольных напитков не коррелирует с высокой концентрацией мочевой кислоты в сыворотке крови [11, c. e97646] и даже может вызывать снижение ее концентрации при экспериментах с оценкой влияния этанола на биохимические показатели крови [12, с. 408].

Отмечается, что хроническая алкогольная интоксикация ассоциирована с повышением содержания уратов в сыворотке крови вследствие: а) усиленного распада адениловых нуклеотидов с образованием предшественников мочевой кислоты [13, с. 457], [14, с. 477], б) ингибирования их экскреции с мочой [15, с. 3369], в) развития кетоацидоза [16, с. 35] с последующей г) интенсификацией формирования молочной кислоты и возникновением лактат-ацидоза, в результате которого проявляется антиурикозурическое действие лактата – подавление постреабсорбционной секреции уратов в проксимальных почечных канальцах [17, с. 563].

Понижение секреции уратов могут развиваться в условиях нарушения окисления клетками масляной кислоты с образованием кетоновых тел, которые вытесняют мочевую кислоту из связи с котранспортерами мочевой кислоты и органических анионов и переносятся в первичную мочу, а мочевая кислота эпителия проксимальных канальцев.

Повышение уровня мочевой кислоты в ранние сроки развития алкогольной абстиненции могут быть рассмотрены с положительной стороны в аспекте реализации мочевой кислотой своей антиоксидантной функции, связанной с активностью в отношении различных свободнорадикальных субстанций [18, с. 58]. Дальнейшее возвращение содержания мочевой кислоты к данным контрольной группы может обусловлено тем, что активные формы кислорода окисляют мочевую кислоту с образованием аллантоина [19, с. 720], [20, с. 667].

Повышение содержания метаболитов в межклеточной среде многоклеточного организма (в том числе, мочевой кислоты) предполагает запуск и реализацию биологической функции эндоэкологии – поддержания «чистоты» межклеточной среды – для предотвращения превышения соответствующей нормы для того или иного параметра. «Замусоривание» (littering) межклеточной среды предопределяет необходимость удаления ненужных веществ по механизму усиления гломерулярной фильтрации, что отражено в лабораторном тесте микроальбуминурии. Предполагают, что сопряженность данных процессов связана с увеличением давления крови в пуле внутрисосудистой жидкости (артериального давления); следующего вслед за этим усилением клубочковой фильтрации и нарушением полной реабсорбции альбумина из первичной мочи [5, c. 32,33].

Как при повышении содержания мочевой кислоты в крови отмечаются позитивные корреляции с увеличением концентрации С-реактивного белка [5, с. 295], развитием микроальбуминурии [21, с. 458], повышением артериального давления [22, с. 1466], так и при алкоголизме выявляется активация острофазовых белков [23, с. 309], выделение в составе мочи белков [26, с. 464] и симптомы артериальной гипертонии [25, с. 346].

Таким образом, можно предполагать, что в условиях алкогольной зависимости происходят определенные изменения в плане выполнения организмом по крайней мере биологических функций трофологии эндоэкологии.

При использовании в схеме лечения предшественника восстановленного глутатиона соответствие концентрации в сыворотке крови мочевой кислоты значениям группы сравнения происходит раньше. Вероятно, это изменение может быть связано с тем, что в результате превращения препарата при участии глутатионредуктазы образующийся восстановленный глутатион «берет на себя» определенную часть антиокислительной защиты, а повышенное количество мочевой кислоты в крови элиминируются реализации биологической функции эндоэкологии в биологической реакции экскреции.

По одним данным при моделировании действия этанола и при алкогольной зависимости снижается уровень антиоксидантных резервов печени, особенно обусловленных действием основного тиолового, внутриклеточного антиоксиданта – восстановленного глутатиона [15, с. 9-12]. В тоже время другими авторами демонстрируется противоположный эффект алкоголизации. Показано, что при оценке влияния этанола на метаболические процессы путем форсированной алкоголизации, происходит статистически значимое увеличение содержания небелковых сульфгидрильных групп в ткани печени. Число общих сульфгидрильных групп при этом не меняется. Увеличение уровня восстановленного глутатиона авторы считают адаптивным и связывают с повышением функциональной активности ферментов биосинтеза глутатиона [16,с. 36]. Неоднозначность фактических данных определяет необходимость дальнейшей проработки вопросов негативного влияния этилового спирта на свободнорадикальные процессы.

Цель исследования

Установление закономерностей, описывающих роль увеличения содержания небелковых сульфгидрильных групп, в механизмах токсического действия алкоголя.

Материалы и методы исследования

В экспериментальных исследованиях использовали белых беспородных крыс-самцов. Животным однократно, интраперитонеально вводили 20%-й раствор этилового спирта в дозе 2г/кг массы животного. Контрольным животным вводили физиологический раствор. Через сутки проводили взятие биологического материала.

Выделяли надмитохондриальную и митохондриальную фракции гомогената ткани печени. Исследовали параметры Fe²⁺ – индуцированной хемилюминесценции по Ю.А. Владимирову (1989).

Надмитохондриальная фрация гомогенатов печеночной ткани использовалась для определения активности ферментов антиоксидантной системы: супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы, глутатионтрансферазы, глутатионредуктазы.

Концентрацию восстановленного глутатиона и количество сульфгидрильных групп определяли в цельных гомогенатах ткани печени.

В сыворотке крови исследовали количество доступных HS-групп на 1г белка, активность гамма-глутамилтранспептидазы и величину светосуммы пероксид-индуцированной хемилюминесценции за 1 минуту. Статистическая обработка данных осуществлялась с использованием программы SPSS 11.5. Оценка значимости различий проводилась с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни (U). Связь двух переменных оценивали с помощью корреляционного анализа по Спирмену. Для выявления нелинейных связей использовали регрессионный анализ.

Через сутки после введения этанола в печени животных выявлена интенсификация свободнорадикальных процессов, которая заключалась в 1) укорочении латентного периода (r) хемилюминесценции надмитохондриальной фракции на 27,5%,(рU=0,034); 2) высокой амплитуде быстрой вспышки (h) хемилюминесценции надмитохондриальной жидкости (в 5,44 раза превышает данные контроля, рU <0,001) и митохондрий в 2 раза (рU =0,01); 3) увеличении светосуммы (S) хемилюминесценции митохондрий на 22,9% (рU=0,049) и скорости окисления, зависящей от прооксидантов (tgα) на 50,8% (рU =0,005).

Накопление гидроперекисей (по показателю h) при алкоголизации сопровождается повышением активности каталазы на 25,2% (рU=0,034), а рост способности липидов к переокислению (по показателю S) — низкой активностью цитозольной изоформы глутатионпероксидазы печени (на 7,4% ниже контрольной группы, рU=0,011).

Активация свободнорадикальных процессов сочетается с инициацией использования антиоксидантных резервов митохондрий: удлинением r на 45,1% (рU=0,021) и повышением внутриклеточной концентрации восстановленного глутатиона на 45,1% (рU=0,003). Возможно адаптивное привлечение тиолов в печень из крови (у=0,105Х+2,19, рU=0,01; рU <0,001, где у – доступные НS-группы сыворотки, Х – S хемилюминесценции надмитохондриальной жидкости) в результате снижения уровня доступных HS-групп в печени при активации свободнорадикального окисления (у=-47,0Х+1020,2; рU=0,003, рU<0,001, где у – доступные НS-группы печени, Х – S хемилюминесценции надмитохондриальной жидкости; у=-0,001Х+3,74, где у – HS-группы сыворотки, Х – HS-группы печени, рU<0.001).

Увеличение содержания восстановленной формы глутатиона также может быть следствием угнетения глутатионпероксидазы. В этом случае участие глутатиона в антиоксидантной защите сводится, главным образом, к неферментативной нейтрализации свободных радикалов. При этом глутатион окисляется, образуя окисленный глутатион и промежуточные формы. Глутатион, как неферментативный антиоксидант, эффективно работает только кратковременно, в начале развития окислительного стресса, затем накапливаются продукты неполного окисления глутатиона — тиильные радикалы.

Считают, что повышение уровня глутатиона в условиях алкогольной интоксикации обусловлено высокой интенсивностью работы ферментов образования глутатиона через влияние оксида азота, в формировании которого принимает участие индуцибельная изоформа фермента NO-синтазы [16,с. 36].

Возможно проявление одного из токсических действий оксида азота — образование моно- и дитиольных комплексов с глутатионом, способных индуцировать апоптоз и некроз. Концентрация глутатиона имеет значение для выбора пути гибели клетки. Чем больше глутатиона, тем вероятнее образование мононитрозотиолов, индуцирующих апоптоз, чем меньше — тем более вероятно образование динитрозотиолов, индуцирующих некроз. Данное обстоятельство, по-видимому, объясняет существование отрицательной зависимости активности γ-глутамилтрансферазы сыворотки крови (маркера повреждения клеток путем некроза) от уровня восстановленной формы глутатиона в печени: у=-2,16Х+50,6, р=0,046, р=0,007.

Одной из возможностей внутриклеточного резервирования оксида азота является наличие нитрозоглутатиона. Для него характерна высокая химическая стабильность по сравнению с другими эндогенными формами нитрозотиолов, в частности с S-нитрозо-цистеинилглицином. S-нитрозо-цистеинилглицин выделяется при катаболизме глутатиона вместе с глутаминовой кислотой под каталитическом действии гамма-глутамилтранспептидазы. В связи с этим, возможно рассмотрение активности гамма-глутамилтранспептидазы как регуляторного фактора, определяющего внутриклеточную концентрацию оксида азота.

Корреляционный и регрессионный анализ показывает, что наблюдаемое увеличение содержания глутатиона в печени алкоголизированных животных неблагоприятно: доступные сульфгидрильные группы сыворотки крови способны усиливать липопероксидацию в надмитохондриальной фракции (у=8,01Х-16,8; р=0,01; р=0,024, где у – S хемилюминесценции надмитохондриальной жидкости, Х – доступные HS-группы сыворотки), а избыток внутриклеточного глутатиона — липопероксидацию в митохондриях (у=0,077Х+7,42; р=0,012; р=0,003, где у – S хемилюминесценции митохондрий, Х – GSH, мкмоль/г белка) и подавлять активность каталазы (у=-0,148Х+41,2; р=0,048; р<0,001, где у – активность каталазы, Х – GSH, мкмоль/г белка). Активность глутатионредуктазы печени положительно коррелирует с интенсивностью хемилюминесценции сыворотки крови (k=0,855; р=0,001).

Таким образом, накопление восстановленного глутатиона без адекватной активации третьей линии ферментативной антиоксидантной защиты (глутатионпероксидазы, глутатионтрансферазы), потребляющей его в реакциях обезвреживания вторичных радикалов, может быть одним из факторов токсического действия алкоголизации.

Материалы и методы

В эксперименте использовали 76 беспородных крыс-самцов массой 180-220 г. Для формирования нарушений обменных процессов, аналогичных для алкогольного абстинентного синдрома, применяли модель экспериментального алкоголизма, разработанную проф. Абдрашитовым А.Х. и соавт. (1987). Согласно этой модели, которая позволяет смоделировать нарушения обмена веществ у крыс независимо от фактора предпочтения алкоголя, животным интрагастрально вводили 25% раствор этанола в дозе 8 г/кг в сутки в течение 4 дней и 4 г/кг/сут на 5 сутки. Животные подвергались декапитации под эфирным наркозом через 1 (группа А1, n=12), 2 (группа А2, n=12), 3 (группа А3, n=12) суток после заключительного введения алкоголя. Животным контрольной группы (n=10) проводилось интрагастральное, эквиобъемное введение воды.

Для оценки влияния этилметилгидроксипиридина сукцината (препарат «Мексидол», раствор для внутримышечного и внутривенного введений, в ампулах по 2 мл) на уровень мочевой кислоты в период реакции отмены этанола были сформированы три группы животных, которым внутримышечно вводили «Мексидол» 50 мг/сут в период развития реакции отмены этанола. Выведение животных из эксперимента и измерение показателей проводилось через 1 (группа А1+М, n=10), 2 (группа А2+М, n=10) и 3 (группа А3+М, n=10) суток после последнего введения алкоголя.

Статистическая обработка полученных данных проводилась с помощью компьютерной программы AnalystSoft Inc., Statplus, версия 5. В качестве основных характеристик описательной статистики применяли медиану (Ме), нижний 25-й (L) и верхний 75-й (Н) квантили (Me; L; H). Оценку статистической значимости различий проводили с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни (U).

Результаты и их обсуждение

Результаты исследования показали, что уровень мочевой кислоты в сыворотке крови животных в группах А1 и А2 повышен по отношению к группе контрольных животных на 30,4% (pU=0,012) и 25,7% (pU=0,005), соответственно. Сывороточное содержание мочевой кислоты в данных группах составило 345,0 (294,4; 423,6) и 332,6 (316,5; 403,9) мкмоль/л, соответственно.

Оценка влияния этилметилгидроксипиридина сукцината на уровень мочевой кислоты в сыворотке крови лабораторных животных в 1 сутки реакции отмены этанола выявила увеличение данного показателя на 23,0% (pU=0,014) по отношению к контролю, значение которого составило 325,4 (307,9; 423,0) мкмоль/л. В следующие сроки оценки (2, 3 сутки отмены этанола) в условиях применения Мексидола содержание мочевой кислоты статистически не отличалось от значений группы сравнения.

Наличие мочевой кислоты в организме животных предопределено необходимостью удаления конечных продуктов метаболизма азота. В связи с тем, что при выведении азота из организма в виде мочевой кислоты объем мочи существенно уменьшается, она является, наряду с мочевиной, аллантоином, креатинином, креатином, аминокислотами, одной из важнейших форм экскреции азота из организма видов, жизнедеятельность которых осуществляется на суше. По причине мутационных изменений генетического материала в филогенезе насекомые, птицы, рептилии, человекообразные приматы и человек, потеряли способность синтезировать фермент уриказу (уратокидазу), который ускоряет превращение мочевой кислоты в аллантоин. Данные изменения обусловили более высокое содержание этого метаболита в организме указанных видов [1, с. 282]. В организме крыс мочевая кислота вместе с аллантоином является ключевым конечным продуктом катаболизма пуриновых азотистых оснований [2, с. 2931-2941].

Молекулы эндогенного происхождения рассматриваются в качестве компонентов антиокислительной системы при значительном их содержании в клетках и межклеточном пространстве. Также значимыми факторами, позволяющими расценивать вещества как антиоксиданты, являются их возможность реагировать с различными соединениями свободнорадикального характера с образованием нерадикальных форм молекул [3, с. 615-631].

Исходя из особенностей химического строения мочевой кислоты, ее молекулу предлагается считать компонентом эндогенной части антиоксидантной защиты, осуществляющим акцептирование активных метаболитов кислорода. 2,6,8-триоксипурин (мочевая кислота) может осуществлять инактивацию супероксидных анион-радикалов. Предполагают, что при этом активные формы кислорода обеспечивают (подобно уратоксидазе) превращение мочевой кислоты в аллантоин. Количественное определение аллантоина в тканях и биологических жидкостях представляется косвенным способом оценки интенсивности окислительной модификации белков. В качестве фактов подтверждения значимости предлагаемого метода приводятся данные о положительной корреляционной взаимосвязи параметров пероксид-индуцированной хемилюминесценции и уровня аллантоина [4, с. 586-591].

Антиоксидантный эффект мочевой кислоты связан с тем, что ее основной формой присутствия в плазме крови является диссоциированная натриевая соль. Это определяет формирование в крови одновалентного урат-аниона, имеющего увеличенную стабильность и не участвующего в образовании радикалов пероксидов.

При оценке влияния этилового алкоголя на уровень мочевой кислоты в крови и обмен пуриновых нуклеотидов в целом исследователями отмечено отчетливое воздействие только избыточной и длительной алкоголизации. В других случаях корреляции с сывороточным содержанием мочевой кислоты не выявляется [5, с. e97646.].

По данным Zhang J. et al. (2016) тканевой уровень пуриновых нуклеотидов снижается при моделировании хронической алкогольной интоксикации [6, с. 30639-30647], что, вероятно, является результатом их повышенного распада при воздействии этанола, согласно данным [7, с. 1598-1602]. Результаты исследований соотносятся с информацией [8, 457-462] о повышении уровня мочевой кислоты в сыворотке крови при хроническом введении животным алкоголя.

Также усиление катаболизма соединений, содержащих пуриновые нуклеотиды, подтверждается высоким уровнем пуринов в крови, выявленным Yamamoto T. et al. (1997) при сравнении влияния этанола и фруктозы на метаболизм азотистых оснований [9, с. 544-547]. Причиной такого изменения энзиматической деградации пуринов, в частности аденозинмонофосфата, может являться индуцируемое окислительным стрессом преобразование ксантиндегидрогеназы в ксантиноксидазу. Переходные изменения формы фермента объясняются относительно медленными кальпаин-зависимыми событиями протеолитической трансформации энзима, а также быстрыми окислительными модификациями меркаптогрупп, входящими в состав фермента.

Ксантиндегидрогеназная конверсия при алкогольной патологии во многом связана с наработкой большого количества восстановленной формы никотинамидадениндинуклеотида и возникновением вследствие этого состояния «протонной интоксикации». Механизм реакции превращения ксантина в данном случае меняется и требует участия кислорода с побочным формированием супероксидного анион-радикала, являющегося фактором запуска реакций свободнорадикального окисления различных внутриклеточных субстратов. Ингибирование в условиях воздействия этанолом ксантиндегидрогеназы, выявленное [10, с. 779-785], может представляться фактором, активирующим ксантиноксидазный путь распада пуриновых азотистых оснований, и обуславливать гиперпродукцию активных форм кислорода.

Другой причиной повышенного содержания мочевой кислоты может явиться развитие ацидоза, связанного с образованием избыточного количества молочной кислоты в результате сдвига равновесия реакций, ускоряемых НАД-зависимыми дегидрогеназами, вследствие «протонной» интоксикации при алкоголизации. Лактат обладает антиурикозурическим эффектом, обусловленным ингибированием в проксимальном отделе нефрона постреабсорбционной секреции урат-ионов. В работах [11, с. 35-57; 12, с. 268-274] показана ассоциированность алкогольного кетоацидоза с этанол-индуцированным увеличением плазменной концентрации мочевой кислоты.

Рассмотрение нарушений обмена веществ при алкоголизме в рамках теории биологических реакций и биологических функций позволяет предположить, как минимум, нарушение двух функций: трофологии и эндоэкологии. Наличие образующегося в условиях естественного метаболизма в клетках и появление в крови эндогенного этанола дает возможность говорить о поступлении при алкоголизации такого количества данного эндогенного субстрата, которое будет приводить к нарушению функции трофологии. При избыточном количестве поступающего субстрата, быстро встраивающегося в центральные метаболические пути, возникает существенное изменение многих процессов.

Тесно сопряжена с алкогольной зависимостью гиперпродукция активных свободнорадикальных субстанций. С данной точки зрения увеличение внеклеточного уровня мочевой кислоты может приобретать положительный оттенок, учитывая реализацию антиоксидантной функции. Однако при анализе изменений в аспекте теории биологических функций и биологических реакций повышенный уровень мочевой кислоты будет обуславливать начало выполнения биологической функции эндоэкологии, что вызвано необходимостью предотвратить превышение определенного значения параметров межклеточной среды. Считается, что универсальным механизмом устранения «замусоривания» (littering) межклеточной среды является увеличение скорости клубочковой фильтрации (гиперфильтрация). Выражением функционирования данного механизма предлагают рассматривать лабораторный тест микроальбуминурии. Последовательность событий определяется в порядке повышения давления крови, последующего увеличения интенсивности гломерулярной фильтрации, изменением полного обратного всасывания альбумина из первичного мочевого фильтрата [13, с. 3-13].

Дестабилизация антиоксидантного статуса при хронической алкоголизации отражается на структурной целостности и функционировании мембранных образований, физико-химических свойствах белковых молекул, проявлениях деятельности генетических структур. В данном случае действие (в обычных условиях считающихся минорными) компонентов антиокислительной защиты может приобретать значительно более весомый характер и внешняя лекарственная поддержка эффективности антиоксидантов характеризоваться как один из решающих факторов преодоления окислительного стресса [14, с. 37-43].

Выводы

В условиях моделирования нарушения обменных процессов при состоянии физической зависимости от этанола отмечается повышение уровня мочевой кислоты в сыворотке крови лабораторных животных. Значимость данного изменения может быть объяснена как с точки зрения, определяющей выполнение мочевой кислотой антиоксидантной функции, так и позиций нарушения биологических функций.

Информация о применении лекарственных веществ, обладающих антиоксидантным потенциалом, показывает определенное модулирующее влияние на сывороточное содержание мочевой кислоты при экспериментальном алкоголизме и может быть использована при разработке, оценке эффективности препаратов данной группы у больных алкоголизмом.

Причины и последствия детского алкоголизма

1. Факторы социального характера

Наиболее важная причина детского алкоголизма – это факторы социального характера, например, неблагополучная семья, невысокий уровень жизни и слабый контроль родителей или опекунов ребёнка. Ребёнок тех родителей, которые являются зависимыми от алкоголя, сами зачастую ранее прибегали к употреблению спиртных напитков.

2. Факторы психологического характера

Трудности на почве психологии, наподобие депрессии или тревожности, самоуничижения и низкой самооценки, в том числе могут способствовать употреблению алкоголя детьми и подростками, которые хотят уйти от «серой реальности».

3. Предпосылки в культурной сфере и медиасфере

Рекламные видео, сеющие пропаганду алкоголя и выставляющие его как элемент взрослой и сложившейся жизни, оказывают ощутимое влияние на неокрепшие умы подростков и детей. Кинематограф с телевидением также играют роль в формировании ложного представления о позитивном образе алкоголя.

4. Последствия алкоголизма у детей

Прибегание к алкоголю в ранние годы имеет зачастую катастрофические последствия для здоровья детей. Среди таких последствий особо выделяются следующие:

˗ аномалии в развитии головного мозга и когнитивных функций в организме;

˗ высокий риск медленного, но планомерного развития заболеваний хронического характера, таких как цирроз печени, панкреатит и сердечно-сосудистые заболевания [2];

˗ проблемы в поведении человека, включая неконтролируемую агрессию и склонность к совершению преступлений;

˗ изоляция от общества, асоциальный образ жизни и сложности в общении не только со взрослыми, но и с ровесниками.

Рассмотрим возможные действия по профилактике и борьбе с детским алкоголизмом в аспекте роли семьи, школы и государства.

Ключевая роль в профилактике детского алкоголизма заключается в воздействии на ребенка со стороны самых близких людей – со стороны семьи. Родители должны подавать благоприятный пример для своих детей и демонстрировать ответственное, разумное отношение к алкоголю так же, как и к иным вредным для развития молодого организма веществам. Первостепенно важно отдавать приоритет своевременному обнаружению изменения в поведении ребёнка и оказывать ему требуемую в данной конкретной ситуации и соразмерную поддержку.

Безусловно, школа также играет бесспорную роль в пресечении и профилактике алкоголизма среди детей и подростков. Буклеты, памятки, регулярное проведение в рамках классного часа профилактических бесед, направление которых нацелено на сообщение обучающимся о вреде алкоголя, напоминание о сомнительности перспективы возможного обретения алкогольной зависимости и создание благоприятствующей безалкогольному обучению школьной среды и окружения ребёнка могут существенно уменьшить риск употребления алкоголя в рядах учащихся.

Государственные программы и предпринимаемые в их рамках меры, в том числе лимитирующие продажу алкоголя несовершеннолетним и предполагающие проведение глобальных информационных кампаний о негативном влиянии алкоголя, являются важным комплексным инструментом в противостоянии детскому алкоголизму.

Заключение

Вопрос детского алкоголизма требует рассмотрения в комплексе указанных факторов при непосредственном участии всех ячеек современного общества. В комплексе описанных выше мер предусматриваются условия для безопасного и здорового роста и развития детей, предупреждения алкоголизма в детской и подростковой среде.