Развитие кристаллографических методов исследования биологических субстратов приоткрыло возможности для изучения состава и физико-химических свойств биосред организма человека, в том числе слюны. Это проявляется в диагностической роли кристаллографии, тогда как возможности для исследования состояния организма и его адаптивных резервов рассматриваются лишь в единичных работах [1, 2, 3]. Изучение функционального состояния организма человека – актуальное направление современных медико-биологических и гигиенических исследований. В связи с этим разрабатываются различные методы оценки физиологического статуса организма. В данном контексте особую ценность приобретают неинвазивные методы диагностики. В последние десятилетия активно изучаются биологические жидкости организма при помощи кристаллографических методов, основывающихся на качественном и количественном изучении кристаллограмм биосубстратов. Сущность кристаллографического метода – анализ морфологии кристаллов, формирующихся в процессе дегидратации биологических жидкостей организма [1]. Данные подходы нашли широкое применение при диагностике широкого спектра заболеваний. В частности, слюна используется для оценки заболеваний ротовой полости [2], желудочно-кишечного тракта [3], сахарного диабета [1], а также функционального состояния организма при физической нагрузке и после восстановления [4, 5]. Представленные данные свидетельствуют, что криталлография слюны достаточно объективно отражает функциональное состояние организма как при физических нагрузках, так и при заболеваниях различной этиологии. Особую ценность кристаллоскопия приобретает в связи с необходимостью проведения скрининговых исследований для выявления патологических состояний на ранних стадиях их развития. Кроме того метод информативен, не требует больших финансовых вложений и достаточно прост.
Несмотря на большое количество работ по диагностике состояния организма методами кристаллографии, на наш взгляд недостаточно уделено внимания оценке действия на организм различных фармацевтических препаратов, в связи с этим мы использовали данный поход в своих исследованиях, цель которых заключалась в оценке эффективности мази «Аль-Дерм-1» при помощи кристаллографического исследования слюны.
Нами проведены исследования слюны 26 студентов, давших свое согласие на участие в эксперименте, выполненном в соответствии с принципами Хельсинской Декларации (2013). Все обследуемые были проинформированы о цели исследования и дали согласие на участие в нем. В эксперименте приняли участие студенты 1-2 курсов специальности «Охрана труда» Крымского инженерно-педагогического университета в возрасте 17-19 лет (10 девушек и 16 юношей). Сбор биологического материала (слюны) в объеме 3-4 мл проводился с утра, до начала занятий, так как в активном состоянии и при физических нагрузках кристаллизация слюны ухудшается [4]. Перед проведением эксперимента испытуемые промывали ротовую полость водой. Образцы слюны собирали дважды: до нанесения мази и после. Препараты для микроскопического анализа готовились путем нанесения 0,3 мл слюны на предметное стекло с последующей окраской метиленовой синью и высушиванием в горизонтальном положении в течение 24 часов. Изучение фаций кристаллограмм осуществляли с помощью микроскопа Olympus СХ-1 (Japan) при увеличении в 400 раз. Полученные кристаллограммы оценивали по 5-балльной шкале [5]. В работе была использована мазь «Аль-Дерм-1» (патент № 83502 от 10.09.2013 г., зарегистрирован в государственном реестре патентов Украины), оказывающая противовоспалительное, противозудное, противоаллергическое, кератолитическое и противомикробное действие. Кристаллографию фаций слюны проводили до и через полчаса после нанесения мази с наружной поверхности предплечья в точке ТR-5 Вай-гуань (наружные ворота), применяемой в акупунктуре – точке, координирующей и регулирующей метеочувствительность [6, 7]. Следует отметить, что точка – ограниченный участок кожи и подкожной клетчатки, в котором имеются комплексы взаимосвязанных структур, сосудов микроциркулярного русла, нервов, клеток соединительной ткани. При нанесении мази на точку создается депо биологически активных веществ, оказывающих соответствующее влияние на нервные терминалы, и происходит образование связей между точкой и внутренним органом, в нашем случае – со слюнными железами.
Полученные результаты обрабатывали методом вариационной статистики, математические расчеты выполнялись посредством Microsoft Excel 2003. Оценку достоверности наблюдаемых изменений определяли по t-критерию Стьюдента (показатели считались достоверными при значениях р<0,05).
Анализ 52 образцов слюны испытуемых позволил установить, что кристаллограммы, полученные до и после нанесения мази «Аль-Дерм-1» существенно отличаются между собой. В частности, у большинства волонтеров были обнаружены кристаллограммы, не имеющие четкого рисунка, представляющие мелкие, хаотично разбросанные в поле зрения структуры (рис. 1).

Рис. 1. Кристаллограммы ротовой жидкости волонтеров № 8 (а), № 9 (б), № 12 (в), № 13 (г) и № 15 (д), полученные до применения мази «Аль-Дерм-1».

Следует отметить, что при микрокристаллизации слюны в «норме» характерен четкий рисунок крупных удлиненных кристаллопризматических структур, идущих от центра капли, сросшихся между собой и имеющих древовидный или папоротникообразный вид, что соответствует 5 баллам [4, 5]. В проведенном исследовании ни одна из полученных кристаллограмм не соответствовала максимальному количеству баллов. Данное явление может быть следствием патологических изменений, при которых структура кристаллов нарушается и вместо них под микроскопом обнаруживаются бесформенные образования. Анализ полученных кристаллограмм показал, что фоновые показатели (до нанесения мази) характеризуются мелкой зернистостью, занимающей меньше 50% площади, кроме нее были обнаружены аморфные образования (тела некристаллической природы) и мелкие кристаллические структуры самого разного вида. Данный факт вызывает необходимость проведения диагностического исследования функционального состояния студентов, принимавших участие в эксперименте, с целью выявления причин нарушения кристаллизации их слюны. Ранжирование кристаллограмм, полученных до нанесения мази, позволило идентифицировать исследуемые пробы следующим образом: 1 группа: 5 проб оценены на 4 балла (19,24%), 2 группа: 10 проб – 3 балла (38,46%), 3 группа: 9 проб – 2 балла (34,61%) и 4 группа: 2 пробы – 1 балл (7,69%). Таким образом, средний балл кристаллограмм до нанесения мази составил 2-3 балла.
После применения мази мы наблюдали усиление микрокристаллизации слюны, свидетельствующее об улучшении физиологического состояния организма 80% испытуемых (рис. 2).

Рис. 2. Кристаллограммы ротовой жидкости волонтеров № 8 (а), № 9 (б), № 12 (в), № 13 (г) и № 15 (д) через 30 минут после применения мази «Аль-Дерм-1».

Кристаллограммы характеризовались выраженным перераспределением кристаллического компонента фации от мелких разрозненных одиночных кристаллических структур в сторону сложных поликристаллических образований типа хвоща, листа, дробной зернистости и островков, превалирующих в центральной зоне микропрепарата и занимающих более 50% площади поля зрения.
Анализ кристаллограмм, полученных после нанесения мази «Аль-Дерм-1» позволил установить более высокую оценку, составившую в среднем 3-4 балла. Были получены следующие результаты: 1 группа: 2 пробы – 5 баллов и 3 пробы – 4 балла; 2 группа: 2 пробы – 5 баллов, 4 пробы – 4 балла и 4 пробы – 3 балла; 3 группа: 1 проба – 4 балла, 5 проб – 3 балла и 3 пробы – 2 балла; 4 группа: 2 пробы по 2 балла. Таким образом, анализ полученных результатов на биопробах показал наличие изменения структуры кристаллов слюны после применения мази «Аль-Дерм-1» в сторону усиления кристаллизации, образования листовидных, мохообразных, папоротникообразных форм, что, по-видимому, свидетельствует о положительном влиянии мази на функциональное состояние организма испытуемых, отражающееся на качественном изменении структуры кристаллов слюны.
Кристаллографическое исследование слюны позволило получить диагностическую информацию и оценить эффективность тестируемой мази, оказывающей положительное влияние на функциональный статус организма испытуемых, что отражалось на изменении морфологии кристаллов слюны, регистрируемой при помощи кристаллоскопии.
Анализ результатов кристаллообразования биосубстрата показал, что после нанесения мази имеет место адаптивная перестройка морфологии дегидратированной биосреды, сопровождающаяся увеличением плотности кристаллов и аморфных тел. Следовательно, мазь «Аль-Дерм-1» обладает выраженным адаптивным действием, проявляющемся уже в течение 30 минут после ее нанесения. Результаты проведенного исследования позволили прийти к заключению, что кристаллографический метод исследования эффективен не только в диагностике функционального состояния организма при заболеваниях различной этиологии и физических нагрузках, но также может быть использован для скрининга терапевтического эффекта различных препаратов.

1. Булгакова В. А. Саливадиагностика уровня эндогенных и экзогенных компонентов крови : автореф. дис. … канд. биол. наук / Булгакова В. А. — Краснодар, 1999. — 17 с. 3.
2. Волчецкий А. Л. Кристаллографическое исследование сыворотки крови как метод оценки адаптивных реакций организма : автореф. … канд. мед. наук / Волчецкий Алексей Леонидович. — Архангельск, 1998. — 18 с.
3. Камакин Н. Ф. Современные подходы к кристаллоскопической идентификации состава биологических жидкостей / Н. Ф. Камакин, А. К. Мартусевич // Экология человека. — 2003. — № 5. — С. 23—25.
4. Мартусевич А. К. Информативность исследования кристаллогенеза слюны спортсменов-лыжников в прогнозировании результативности их выступления // Вестник спортивной науки.— Выпуск 4.— 2007.— С. 27-32.
5. Прудникова З.П. К вопросу об изменениях в кристаллической структуре слюны при заболеваниях полости рта // Медицина и здравоохранение: материалы междунар. науч. конф., Чита, ноябрь 2012 г. – Чита: Изд-во Молодой ученый, 2012. –  С. 42-47.
6. Ушаков И.Б., Сорокин О.Г. Адаптационный потенциал человека // Вестник Российской академии медицинских наук. – 2004. – № 3. – С. 8-13.
7. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. – М.: Хризопраз, 2001. – 304 с.
8. Shabalin V. N. Character of blood crystallization as an integral index of organism homeostasis / V. N. Shabalin, S. N. Shatokhina, S. A. Yakovlev // Phys. Chem. Biol. Med. — 1995. — Vol. 2, N 1. — P. 6—9.

Все статьи автора «Сатаева Татьяна Павловна»